黄昕颖, 程祖锌, 肖长春, 黄志伟, 郑金贵. 2015: 水稻种子特异表达启动子Ole18的克隆、序列分析及功能验证. 南方农业学报, 46(7): 1147-1153. DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2015.7.1147
引用本文: 黄昕颖, 程祖锌, 肖长春, 黄志伟, 郑金贵. 2015: 水稻种子特异表达启动子Ole18的克隆、序列分析及功能验证. 南方农业学报, 46(7): 1147-1153. DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2015.7.1147
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HUANG Xin-ying, CHENG Zu-xin, XIAO Chang-chun, HUANG Zhi-wei, ZHENG Jin-gui. 2015: Cloning, sequence analysis and functional verification of seed specific expression promoter Ole18 gene from rice. Journal of Southern Agriculture, 46(7): 1147-1153. DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2015.7.1147
Citation: HUANG Xin-ying, CHENG Zu-xin, XIAO Chang-chun, HUANG Zhi-wei, ZHENG Jin-gui. 2015: Cloning, sequence analysis and functional verification of seed specific expression promoter Ole18 gene from rice. Journal of Southern Agriculture, 46(7): 1147-1153. DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2015.7.1147
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水稻种子特异表达启动子Ole18的克隆、序列分析及功能验证

Cloning, sequence analysis and functional verification of seed specific expression promoter Ole18 gene from rice

    摘要
  • 摘要: 目的克隆水稻种子特异表达启动子Ole18,为实现外源基因在水稻胚、糊粉层特异表达奠定基础.方法采用PCR克隆扬稻6号Ole18启动子序列,并连接至pMD20-T载体上,经PCR验证后进行测序,并对测序结果进行生物信息学分析;用克隆获得的Ole18启动子取代pCAMBIA1301载体中GUS基因上游的CaMV35S启动子构建重组表达载体,经农杆菌介导转化台粳9号,获得转基因植株,对其种子进行GUS染色.结果克隆获得大小为1261bp的Ole18启动子序列,与japonica cultivar-group、IR36的18 kD Oleosi基因启动子同源性为99%.启动子预测软件NNPP推测该序列具有启动子的功能,含有种子特异表达启动子所必需的TATA-box、CAAT-box等顺式调控元件.GUS组织化学染色结果表明,该启动子序列能够驱动GUS基因在水稻种子胚及糊粉层中表达.结论克隆获得的Ole18启动子具有启动活性,且具有胚及糊粉层特异性表达功能.

     

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