马晓晓, 李哲, 戴雪梅, 毕政鸿, 方家林, 黄华孙, 李运合, 贺永国. 2014: 橡胶树HbHMGR1基因克隆及其愈伤组织转化. 南方农业学报, 45(5): 818-823. DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2014.5.818
引用本文: 马晓晓, 李哲, 戴雪梅, 毕政鸿, 方家林, 黄华孙, 李运合, 贺永国. 2014: 橡胶树HbHMGR1基因克隆及其愈伤组织转化. 南方农业学报, 45(5): 818-823. DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2014.5.818
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2014: Gene cloning of HbHMGR1 and genetic transformation of callus in Hevea brasiliensis. Journal of Southern Agriculture, 45(5): 818-823. DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2014.5.818
Citation: 2014: Gene cloning of HbHMGR1 and genetic transformation of callus in Hevea brasiliensis. Journal of Southern Agriculture, 45(5): 818-823. DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2014.5.818
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橡胶树HbHMGR1基因克隆及其愈伤组织转化

Gene cloning of HbHMGR1 and genetic transformation of callus in Hevea brasiliensis

    摘要
  • 摘要: 目的克隆橡胶树HbHMGR1基因,转化橡胶树易碎愈伤组织,为橡胶树遗传转化和品种改良打下基础.方法根据已经报道的HbHMGR1基因序列(NCBI登录号X54659.1)设计特异引物,通过RT-PCR克隆HbHMGR1基因,构建pCAMBIA2301-35 S-HbHMGR1植物表达载体.再用EHA105(携带pCAMBIA2301-35 S-HbHMGR1,内含NPTⅡ和uidA基因)侵染橡胶树易碎愈伤组织,数月筛选后对抗性易碎愈伤组织系进行GUS染色和分子检测.结果成功克隆了HbHMGR1基因,双酶切重组质粒、重组质粒的PCR扩增结果证明成功地构建了该基因的植物表达载体pCAMBI-A2301-35S-HbHMGR1.侵染后抗性橡胶树易碎胚性愈伤组织GUS检测为蓝色,且分子检测呈现阳性,共获得15个抗性易碎愈伤组织系.结论橡胶树HbHMGR1基因在愈伤组织阶段开始表达,有效提高了HbHMGR1基因在橡胶中的表达量.

     

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