摘要: 目的探讨广西巴马小型猪促生长激素释放激素(GHRH)成熟肽真核表达质粒对小鼠生长效应的影响,为进一步研究广西巴马小型猪GHRH成熟肽的促生长作用及GHRH基因疫苗的高效制备与安全使用提供参考依据.方法利用基因重组技术将广西巴马小型猪GHRH成熟肽序列与pEGFP-N1质粒连接构建重组真核表达质粒,然后按0.5 μg/g的剂量肌肉注射经25%蔗糖溶液预处理的小鼠,观察记录小鼠体重变化情况,并分别提取重组质粒注射组小鼠的心脏、肝脏、肾脏及注射部位肌肉DNA,再以PCR检测是否存在基因质粒残留.结果以构建的pEGFP-GHRH重组质粒注射小鼠后,其外源GHRH成熟肽DNA可在肌肉中获得表达,但并未整合入小鼠基因组中.虽然重组质粒注射组小鼠的末重与空质粒注射组小鼠的差异不显著(P>0.05),但在注射后的10~25 d,重组质粒注射组小鼠体重均显著高于空质粒注射组(P<0.05).在相对日增重率方面,注射后的前15d内,重组质粒注射组小鼠的相对日增重率均高于空质粒注射组.结论构建的广西巴马小型猪pEGFP-GHRH重组质粒能在一定时间内促进小鼠生长,即GHRH种属差异性小,在动物中有较高的保守性.