赵冬敏, 黄欣梅, 刘宇卓, 韩凯凯, 杨婧, 谢星星, 刘晓燕, 李银. 2014: 鹅坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ的原核表达及免疫原性鉴定. 南方农业学报, 45(12): 2259-2263. DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2014.12.2259
引用本文: 赵冬敏, 黄欣梅, 刘宇卓, 韩凯凯, 杨婧, 谢星星, 刘晓燕, 李银. 2014: 鹅坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ的原核表达及免疫原性鉴定. 南方农业学报, 45(12): 2259-2263. DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2014.12.2259
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2014: Prokaryotic expression and immunogenicity identification of goose tembusu virus E protein domain Ⅰ. Journal of Southern Agriculture, 45(12): 2259-2263. DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2014.12.2259
Citation: 2014: Prokaryotic expression and immunogenicity identification of goose tembusu virus E protein domain Ⅰ. Journal of Southern Agriculture, 45(12): 2259-2263. DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2014.12.2259
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鹅坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ的原核表达及免疫原性鉴定

Prokaryotic expression and immunogenicity identification of goose tembusu virus E protein domain Ⅰ

    摘要
  • 摘要: 目的明确鹅坦布苏病毒(GTUMV)E蛋白结构域Ⅰ的原核表达及免疫原性,为进一步研究GTMUV E蛋白结构的生物学特性、免疫学功能等奠定基础.方法通过人工合成方法获得GTMUV E蛋白结构域Ⅰ的编码基因(EI基因),并与携带GST标签的pGEX-4t-1载体连接,转入大肠杆菌后经诱导表达获得融合蛋白,并以Western blotting鉴定融合蛋白是否有免疫原性.结果合成获得的E1基因片段为411 bp,将其插入pGEX-4t-1载体可构建重组表达质粒pGEX-4t-1-EI.阳性重组菌经1 mmol/L IPTG诱导5h后,融合蛋白的表达量达最高峰,且以包涵体形式存在,分子量约41.0 kDa.Western blotting鉴定结果显示,融合蛋白与GST标签抗体和E蛋白阳性血清均可发生特异性反应,检测到预期的目的条带.结论GTMUVE蛋白结构域Ⅰ可在大肠杆菌中成功诱导表达,且获得的融合蛋白具有良好的免疫原性,可用于GTMUV血清学检测试剂盒的研发.

     

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