石晓蒙, 谭飞燕, 黄寿先, 蒙奕奕, 黄家华. 2013: 马褂木ISSR-PCR扩增体系的优化. 南方农业学报, 44(7): 1087-1091. DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2013.7.1087
引用本文: 石晓蒙, 谭飞燕, 黄寿先, 蒙奕奕, 黄家华. 2013: 马褂木ISSR-PCR扩增体系的优化. 南方农业学报, 44(7): 1087-1091. DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2013.7.1087
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SHI Xiao-meng, TAN Fei-yan, HUANG Shou-xian, MENG Yi-yi, HUANG Jia-hua. 2013: Optimization of ISSR reaction system of Liriodendron chinese. Journal of Southern Agriculture, 44(7): 1087-1091. DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2013.7.1087
Citation: SHI Xiao-meng, TAN Fei-yan, HUANG Shou-xian, MENG Yi-yi, HUANG Jia-hua. 2013: Optimization of ISSR reaction system of Liriodendron chinese. Journal of Southern Agriculture, 44(7): 1087-1091. DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2013.7.1087
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马褂木ISSR-PCR扩增体系的优化

Optimization of ISSR reaction system of Liriodendron chinese

    摘要
  • 摘要: 目的建立稳定的马褂木ISSR-PCR扩增体系,为马褂木种群ISSR多样性分析提供技术支持.方法采用单因素试验对ISSR-PCR扩增体系中的MgC12、dNTPs、引物浓度、TaqDNA聚合酶、DNA模板用量和退火温度等主要因素进行筛选优化.结果采用试剂盒方法提取马褂木叶片DNA的效果优于改良CTAB法,最优PCR反应体系为:总体积20.0 μL中含有l0x Buffer 2.0 μL、MgC12 1.8 mmol/L、dNTPs 0.2 mmol/L、引物0.5 μmol/L、Taq DNA聚合酶1.00 U、DNA模板60 ng、退火温度59.1℃.结论优化后的马褂木ISSR-PCR扩增体系能够扩增获得清晰、稳定的条带,可满足马褂木种群ISSR多样性分析的要求.

     

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