特异性检测植物乳杆菌的多重PCR方法

A specific method for detection of Lactobacillus plantarum by multiplex PCR

摘要: 目的建立特异性检测植物乳杆菌的方法,排除近缘菌的干扰.方法利用SMM系统筛选植物乳杆菌种特异序列,根据特异序列设计引物进行不同乳制品的多重PCR检测.结果设计的7对引物具有良好的种特异性,其中3对引物可以排除戊糖乳杆菌和副植物乳杆菌的干扰,可扩增获得植物乳杆菌的特异条带101 bp(引物LP-1和LP-2)、189bp(引物LP-5和LP-6)、378 bp(引物LP-9和LP-10).该方法的检测限为2.2×10 CFU/mL.采用多重PCR检测与琼脂糖凝胶电泳图谱分析对自制含有各种乳酸菌酸奶产品、自然发酵产品及市售酸乳产品中植物乳杆菌进行定性检测,可以特异性检测出植物乳杆菌,准确区分植物乳杆菌的近缘菌株.结论该多重PCR方法成本低、步骤简单、耗时短、灵敏度高,具有特异性,可作为快速检测植物乳杆菌种的方法在生产中使用.