熊发前, 刘俊仙, 王丛丛, 贺梁琼, 韩柱强, 蒋菁, 钟瑞春, 李忠, 唐秀梅. 2013: mCTAB-dLiCl法高效提取花生各组织部位RNA及其验证. 南方农业学报, 44(11): 1781-1784. DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2013.11.1781
引用本文: 熊发前, 刘俊仙, 王丛丛, 贺梁琼, 韩柱强, 蒋菁, 钟瑞春, 李忠, 唐秀梅. 2013: mCTAB-dLiCl法高效提取花生各组织部位RNA及其验证. 南方农业学报, 44(11): 1781-1784. DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2013.11.1781
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2013: mCTAB-dLiCl method for efficiently extracting RNA from various tissues of cultivated peanuts and its vertification. Journal of Southern Agriculture, 44(11): 1781-1784. DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2013.11.1781
Citation: 2013: mCTAB-dLiCl method for efficiently extracting RNA from various tissues of cultivated peanuts and its vertification. Journal of Southern Agriculture, 44(11): 1781-1784. DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2013.11.1781
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mCTAB-dLiCl法高效提取花生各组织部位RNA及其验证

mCTAB-dLiCl method for efficiently extracting RNA from various tissues of cultivated peanuts and its vertification

    摘要
  • 摘要: 目的探讨花生不同组织部位RNA提取方法,为开展花生分子生物学研究奠定基础.方法在CTAB法的基础上,设计一种改良的mCTAB-dLiC1法,其使用高质量体积分数的KAC除去组织中的多糖,使用两次10.0 mol/L的LiC1沉淀RNA,采用琼脂糖凝胶电泳检测RNA质量,核酸蛋白分析仪测定RNA纯度,并通过逆转录、RT-PCR和cDNA-SCoT验证其质量.结果采用mCTAB-dLiC1法的RNA产率为554.80 μg/g,RNA的A260/A280比率为1.89,RNA非变性琼脂糖凝胶电泳未出现可见的DNA条带;扩增的28S和18S条带比值为2∶1,且条带清晰无拖尾现象;提取的RNA通过逆转录、RT-PCR扩增和cDNA-SCoT扩增验证,均获得较好的扩增效果,获得的RNA和cDNA质量好.结论mCTAB-dLiCl RNA提取方法是一种高效提取花生各组织部位RNA的方法,可在花生分子生物学研究中应用.

     

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