唐文忠, 陆国昆, 廖芬, 黄茂康, 黄伟雄, 黄僚才. 2011: 番木瓜幼叶原生质体分离研究. 南方农业学报, 42(5): 468-470. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2011.05.002
引用本文: 唐文忠, 陆国昆, 廖芬, 黄茂康, 黄伟雄, 黄僚才. 2011: 番木瓜幼叶原生质体分离研究. 南方农业学报, 42(5): 468-470. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2011.05.002
TANG Wen-zhong, LU Guo-kun, LIAO Fen, HUANG Mao-kang, HUANG Wei-xiong, HUANG Liao-cai. 2011: Isolation of protoplast from young leaves of papaya. Journal of Southern Agriculture, 42(5): 468-470. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2011.05.002
Citation: TANG Wen-zhong, LU Guo-kun, LIAO Fen, HUANG Mao-kang, HUANG Wei-xiong, HUANG Liao-cai. 2011: Isolation of protoplast from young leaves of papaya. Journal of Southern Agriculture, 42(5): 468-470. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2011.05.002

番木瓜幼叶原生质体分离研究

Isolation of protoplast from young leaves of papaya

  • 摘要: 目的探讨番木瓜幼叶原生质体的最佳分离条件.方法以20~30 日龄番木瓜无菌苗幼叶为材料,对原生质体分离过程中酶液组合、酶解时间、纯化离心速度(500~1500 rpm)及离心时间(6~10 min)进行探讨.结果随着酶解液中纤维素酶和果胶酶含量的提高,番木瓜原生质体产量逐渐升高,而其活力逐渐降低,其中以为2.0%纤维素酶+0.5%果胶酶组合的效果较好,解离时间以8 h为宜.随着酶解液中甘露醇浓度的升高,原生质体的产量呈现先增加后降低的趋势,在0.55 mol/L时达到最大(2.48×106个/gFW).在悬浮纯化原生质体时,以1000 rpm离心6~8 min的效果较好.结论适宜原生质体分离的酶解液为2.0%纤维素酶+0.5%果胶酶+25 mmol/L MES+0.55 mol/L甘露醇,最适酶解时间为8 h;在原生质体纯化时,使用1000 rpm离心6~8 min,有利于获得产量及活力较高的原生质体.

     

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