阴离子交换层析分离鲍肌肉萎缩症病毒
Isolation of abalone shriveling syndrome-associated virus by anion exchanger chromatography
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摘要: 目的建立与优化阴离子交换层析分离纯化鲍肌肉萎缩症病毒(Abalone shriveling syndrome-associatedvirus,AbSV)的方法,为今后深入研究其形态结构及致病性打下基础.方法利用病毒表面带负电的特性,建立QSepharose Fast Flow阴离子交换层析分离鲍组织中AbSV的方法,同时结合荧光定量PCR检测AbSV含量以确定其流出峰和电导率.结果AbSV峰集中在电导率为32~40 mg/cm时所收集的组分中.将收集液用30 kD滤膜浓缩后进行SDS-PAGE凝胶电泳检测,发现AbSV阳性样品呈现出特有的蛋白条带.对特异蛋白条带切胶回收后进行质谱分析,证实5条蛋白条带中有2条鉴定为AbSV重组酶.结论以阴离子交换层析分离鲍肌肉萎缩症病毒具有可行性,其电导率为32~40 mg/cm时的流出峰为AbSV组分.