猪肺血管紧张素转化酶的提取与纯化

Extraction and purification of angiotensin converting enzyme from fresh hog lung

摘要: 目的研究猪肺血管紧张素转化酶(ACE)的提纯方法,为其生产利用提供技术支撑.方法以新鲜猪肺组织为试验材料,匀浆离心后经硫酸铵分级沉淀透析,然后采用离子交换-超滤离心联合法对猪肺ACE粗提物进行纯化,测定ACE的分子量、酶活力、纯化倍数及酶活力回收率.结果通过离子交换-超滤离心联合法分离纯化猪肺ACE,可得到相对分子量182 kDa、酶比活力1.2476 U/mg的电泳级纯品ACE,其纯化倍数达357.31倍,酶活力回收率达12.28%.ACE催化反应动力学米氏常数(Km)为0.849 mmol/L,最大反应速率(Vmax)为9.775 nmol/min.结论采用离子交换-超滤离心联合法纯化猪肺ACE能够极大缩短分离与纯化时间,且获得较高的纯化倍数和酶活力回收率,是猪肺ACE的高效纯化方法.