正交设计优化大旗瓣凤仙ISSR-PCR反应体系

赵博, 李景剑, 符支宏, 钟树华

赵博, 李景剑, 符支宏, 钟树华. 2014: 正交设计优化大旗瓣凤仙ISSR-PCR反应体系. 南方农业学报, 45(2): 184-188. DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2014.2.184
引用本文: 赵博, 李景剑, 符支宏, 钟树华. 2014: 正交设计优化大旗瓣凤仙ISSR-PCR反应体系. 南方农业学报, 45(2): 184-188. DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2014.2.184
ZHAO Bo, LI Jing-jian, FU Zhi-hong, ZHONG Shu-hua. 2014: Optimization for ISSR-PCR reaction system in Impatiens macrovexilla Y.L.Chen using orthogonal design. Journal of Southern Agriculture, 45(2): 184-188. DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2014.2.184
Citation: ZHAO Bo, LI Jing-jian, FU Zhi-hong, ZHONG Shu-hua. 2014: Optimization for ISSR-PCR reaction system in Impatiens macrovexilla Y.L.Chen using orthogonal design. Journal of Southern Agriculture, 45(2): 184-188. DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2014.2.184

正交设计优化大旗瓣凤仙ISSR-PCR反应体系

基金项目: 

财政部战略生物资源科技支撑运转专项项目

详细信息
  • 中图分类号: 45-1381/S

Optimization for ISSR-PCR reaction system in Impatiens macrovexilla Y.L.Chen using orthogonal design

  • 摘要: [目的]优化大旗瓣凤仙ISSR-PCR反应体系,为大旗瓣凤仙遗传多样性分析提供技术参考.[方法]利用正交试验设计对大旗瓣凤仙ISSR-PCR反应体系的5个因素(Mg2+、dNTP、引物、TaqDNA聚合酶、模板DNA)4水平进行优化分析,并在此基础上对PCR反应过程中的退火温度进行筛选.[结果]建立了大旗瓣凤仙ISSR-PCR的优化反应体系,即在25.0 μL反应体系中含1×PCR Buffer、Mg+ 1.5 mmol/L、dNTP 0.25 mmol/L、引物0.8 μmol/L、TaqDNA聚合酶0.75~1.00 U、模板DNA 100 ng.通过该体系可以筛选出6条对大旗瓣凤仙种群扩增效果较好的引物.[结论]优化的ISSR-PCR反应体系具有较高的稳定性,可用于大旗瓣凤仙及凤仙属植物种群的ISSR遗传多样性分析.
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出版历程
  • 刊出日期:  2014-02-27

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