农杆菌介导的葡萄柚转化再生体系建立研究

Establishment regeneration system for Citrus.paradisi Macf.cv Duncan by Agrobacterium-mediated transformation

摘要: 目的建立邓肯葡萄柚上胚轴遗传转化再生体系,为葡萄柚基因转化研究奠定基础.方法以邓肯葡萄柚上胚轴为外植体,研究上胚轴不定芽和生根诱导、遗传转化的影响因子.结果在添加TDZ 0.50~1.00 mg/L的培养基上,上胚轴不定芽诱导率为72.7%~81.6%;无菌枝条的最适生根条件为1/2MT添加ABT6号1.0 mg/L,生根率可达81.3%.不同抗菌素中,以替门汀杀菌效果较好,且对外植体出芽无明显抑制作用.转化芽选择初期,5~7 d的暗培养有利于卡那霉素抗性芽的诱导发生.PCR检测结果显示,7株抗性植株中有6株呈阳性.结论建立了邓肯葡萄柚上胚轴植株再生繁殖体系,为其基因转化奠定了基础.