聚乙烯醇固定化胆固醇氧化酶的研究

Study on cholesterol oxidase immobilized by polyvinyl alcohol (PVA)

摘要: 目的探讨类芽孢杆菌胆固醇氧化酶(COD)的固定化,为COD的应用研究提供参考依据.方法以不同浓度的聚乙烯醇、硼酸为主要材料制备固定化酶,并通过试验确定制备固定化酶的最适浓度、最佳反应温度、最适pH、热稳定性、酸稳定性、米氏常数及操作稳定性.结果选用12%聚乙烯醇、5%硼酸制备的固定化酶形状好、强度适中、易操作、固定化率高,其最适反应温度60℃,最适反应pH 7.0,热、酸稳定性比游离酶好,且稳定范围较游离酶宽,表观米氏常数Km(2.55×10-5 mol/L)相对游离酶变小,重复使用5次后酶活力仍能保持在67.8%以上,半衰期为8.91次.结论聚乙烯醇制备的固定化COD稳定性好,与底物亲和力较强,可重复回收利用,具有良好的应用前景.