摘要: 建立多重PCR鉴定水牛胚胎性别技术体系,为下一步优化多重巢式PCR奠定基础.采用热裂解、蛋白酶K+二硫苏糖醇(DTT)和吐温-20+DTT分别提取水牛卵裂球DNA,比较3种对G3PDH基因扩增效;同时设计1对检测引物和1对内标引物用于胚胎性别鉴定,提取胚胎DNA后进行多重PCR检测.吐温-20+DTT具有良好裂解效,其有效检出率为97.1%;而经吐温-20+DTT抽提DNA用于多重PCR检测,其胚胎鉴定率达到100.0%.采用吐温-20+DTT处理水牛胚胎样品后再进行多重PCR性别鉴定可以简化操作步骤、提高鉴定效率,但样品数量不宜太少.